EDTA脱钙液
货号:KH-OS-OT-1L
规格:1000ml 2.5L
保存条件:4C保存,一年有效,避免阳光直别
产品简介:
在病理实验制作切片时,我们会经常础到一些含钙组织,而且钙十分坚硬。由于组织中的钙和石蜡之间的密度不同,含钙的组织一般不能直接制作切片。骨组织含钙量最多。除了
骨组织之外其它组织也可发生钙化,在组织中形成钙化区,所以需要经过脱钙过程。脱钙是制作骨组织切片的重要环节,尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。
乙胺四乙酸(EDTA)与羟基磷灰石结晶的外层钙结合,形成可溶性的非离子化合物,同时又促进晶体内层的结合钙向外转移。借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融
解,pH中性时可起螯合作用。其特点是脱钙时间长,对骨组织的损伤少,酶活性(碱性磷酚酶〉和细胞抗原性保存较好,制作的切片可用于组织化学和免疫组化分析。
主要用途:
用于骨组织、牙齿等脱钙。
使用说明:
1.将骨组织截成0.5cm×0.3cm×0.2cm大小骨片,生理盐水清洗后立即投入冷冻的固定液中,
4℃固定12h-24h;固定结束后骨片在0.2M磷酸缓冲液中充分漂洗.
2.漂洗后投入脱钙液中,室温下脱钙,每日检査脱钙情况,直至骨片脱钙完全为止。脱钙结
束后,骨片用蒸馏水冲洗20min,脱钙液每隔4-5天更换一次新液,经过3次更换新液后,
此后每天更换新液,但请根据具体实验具体分析。以大头针能刺进骨密质为完成脱钙标准
3.然后进入常规脱水处理程序并包埋、切片
注意事项:
1为使脱钙更为充分,每次**更换新液,这既弃去了脱掉的钙盐,增加脱钙强度,又起
降低脱钙温度的作用
2。脱钙时间以脱钙完成为标准:以大头针能轻易刺进骨密质为准。
3。脱钙温度不要太高,一般以室温(25℃)为宜,高温可加快脱钙速度,但可破坏组织中的
核酸而影响染色效果。低温(4℃)则会减慢脱钙速度,使组织在脱钙液中浸泡过久而引起
损伤
4。为了提高EDTA的脱钙速度,骨组织取材尽量取薄
5为了提高EDTA的脱钙速度,也可以采用微波脱钙。用微波炉辅助脱钙可以大大缩短脱
钙时间,以微波间歇脱钙,每次辐射1分钟,每次辐射之间都将烧杯移至室温,冷却5分钟
以保证每次的微波辐射脱钙液的温度不至于太高(℃)。脱钙时脱钙液温度过高,易导致假
阴性,背景色深等缺点。因此,在时间要求不紧迫的前提下,该方法也不应是首选。
6为达到骨组织既充分脱钙,又保护骨组织的抗原不受破坏,需要对含钙的组织充分固定之
后再进行脱钙。然后再行常规制片.